Υβριδωματικό μέσο επέκτασης και υποκλωνοποίησης κυττάρων 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 Περιγραφή προϊόντος

产品名称

Όνομα προϊόντος

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Υβριδωματικό μέσο επέκτασης και υποκλωνοποίησης κυττάρων

货号 Cat.No

BRS-MED02

规格

Προσδιορισμός

500 ml/μ

500 mL/φιάλη

产品组分

εξαρτήματα

DMEM基础培养基:80%(体积比)

Βασικό μέσο DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Εμβρυϊκός ορός βοοειδών (FBS, εισαγόμενος): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Ρυθμισμένο μέσο: 10% (v/v)

青霉素: 100 λίρες/mL

Πενικιλλίνη: 100 U/mL

链霉素: 100 λίρες/mL

Στρεπτομυκίνη: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Άλλα πρόσθετα: Μεμονωμένοι-παράγοντες πολλαπλασιασμού κυττάρων και μικρομοριακά συμπληρώματα

保存条件

Συνθήκες αποθήκευσης

-20 βαθμοί 保存, 有效期 18 个月.

Αποθηκεύεται στους -20 βαθμούς, διάρκεια ζωής 18 μήνες

使用方法

Οδηγίες χρήσης

培养基融化:

37 μοίρες 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5 λεπτά使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Απόψυξη του μέσου:

Ξεπαγώστε το μέσο σε υδατόλουτρο 37 μοιρών. Σκουπίστε την εξωτερική επιφάνεια με αιθανόλη 70% και τοποθετήστε σε ντουλάπι βιοασφάλειας για χρήση.
Σημείωση: Η εμφάνιση μικρής ποσότητας λευκού κροκιδωτού υλικού μετά την απόψυξη είναι φυσιολογική. Αφήστε το μέσο να σταθεί για 3–5 λεπτά για να κατακαθίσουν οι κροκίδες και, στη συνέχεια, συλλέξτε το υπερκείμενο για χρήση.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0,8-1,5cell/孔/200ul培养基铺.

Χειρισμός Fusion Wells – Υγιή κύτταρα:

Για φρεάτια σύντηξης με κύτταρα σε καλή κατάσταση (π.χ. μεσαίου χρώματος κανονικό ή ελαφρώς κίτρινο, τα κύτταρα στο μικροσκόπιο φαίνονται υγιή, φωτεινά και κανονικά σε μέγεθος), μεταφέρετε απαλά με σιφώνιο πάνω-κάτω με ένα κίτρινο άκρο πιπέτας. Μετρήστε τα κύτταρα και πλακώστε με 0,8–1,5 κύτταρα/πηγάδι σε μέσο 200 µL.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Χειρισμός Fusion Wells – Μη βέλτιστα κύτταρα:

Για φρεάτια σύντηξης με κύτταρα σε μη βέλτιστη κατάσταση (π.χ. μεσαία οξινισμένα/κίτρινα ή τα κύτταρα φαίνονται συρρικνωμένα, σκοτεινά στο μικροσκόπιο), είναι διαθέσιμες δύο επιλογές για επακόλουθη υποκλωνοποίηση:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 κελί/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Επιλογή 1: Μεταφέρετε τα κύτταρα από το φρεάτιο σύντηξης σε μια πλάκα 24 φρεατίων που περιέχει 1 mL αυτού του μέσου. Μετά από 2-3 ημέρες επέκτασης, μετρήστε τα κύτταρα και εκτελέστε υποκλωνοποίηση σε 0,8-1,5 κύτταρα/πηγάδι σε 200 µL μέσου. Σε αυτό το στάδιο, ο διπλασιασμός των κυττάρων είναι περιορισμένος, αλλά η κατάσταση των κυττάρων είναι καλή, γεγονός που το καθιστά ιδανικό για υποκλωνοποίηση.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培补养域CO2静置培养3-4小时,然后取样细胞计数后进行亚克隆(0,8-1,5cell/孔/200ul培养基);

Αφαιρέστε προσεκτικά το υπερκείμενο από το φρεάτιο σύντηξης χρησιμοποιώντας ένα κίτρινο άκρο πιπέτας και προσθέστε 200 µL φρέσκου μέσου ανά φρεάτιο. Επωάστε στους 37 βαθμούς, 5% CO2 για 3–4 ώρες. Στη συνέχεια, δοκιμάστε τα κύτταρα, μετρήστε και εκτελέστε υποκλωνοποίηση σε 0,8–1,5 κύτταρα/πηγάδι σε 200 μL μέσου.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Σημείωση: Οι υποκλώνοι που καλλιεργούνται με το μέσο επέκτασης και υποκλωνοποίησης κυττάρων υβριδώματος συνήθως φτάνουν σε ένα στάδιο κατάλληλο για κατάντη διαλογή ή ανάλυση τις ημέρες 6-8 μετά την-υποκλωνοποίηση.